الهدف: كان الهدف من هذه الدراسة مقارنة فعالية كلٍّ من هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5% [Ca(OCl)₂]، وهيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% (NaOCl)، وكلورهيكسيدين بتركيز 2% (CHX)، عند تطبيقها وفق بروتوكولات تحريك مختلفة، في التعقيم السريع لأقماع الغوتا-برشا الملوثة بمكورة البرازيات (Enterococcus faecalis). الطرق: جرى أولاً اختبار النشاط المضاد للأغشية الحيوية لكل محلول ضد مكورة البرازيات في حُقَن زراعة الخلايا. بعد ذلك، قُسِّمت أربعة وخمسون قمعًا من الغوتا-برشا الملوثة بالمعلق البكتيري إلى ثلاث مجموعات متساوية (n=18) وخضعت لعملية التعقيم باستخدام أحد المحاليل الثلاثة (هيبوكلوريت الصوديوم 2.5%، هيبوكلوريت الكالسيوم 2.5%، أو كلورهيكسيدين 2%). كما تم تقسيم كل مجموعة إلى فئات فرعية وفق طريقة التطبيق (بدون تحريك، بالتحريك بالموجات فوق الصوتية، أو بالتحريك باستخدام جهاز إيزي كلين) وفترة التعرض لكل محلول (دقيقة واحدة أو خمس دقائق) (n=6). وبعد عملية التعقيم، فُحصت العينات لقياس العكارة، وجرى تقييم المستعمرات الحية، ثم تم تحليل البيانات باستخدام تحليل التباين الأحادي (ANOVA) واختبارات ما بعد تحليل التباين لتوكي (α = 5%). النتائج: أظهرت محاليل هيبوكلوريت الصوديوم 2.5%، وهيبوكلوريت الكالسيوم 2.5%، وكلورهيكسيدين 2% تدميرًا معنويًا للغشاء الحيوي وتثبيطًا لتكوّنه (p < 0.0001). ومن حيث تقليل المستعمرات الحية، كانت محاليل هيبوكلوريت الكالسيوم 2.5% وكلورهيكسيدين 2% فعّالتين في جميع طرق التطبيق، سواء عند دقيقة واحدة أو خمس دقائق (p < 0.05). أما هيبوكلوريت الصوديوم 2.5% فكان فعّالًا فقط عند التحريك بالموجات فوق الصوتية لمدة خمس دقائق (p < 0.05). ولم تُظهر قراءات مقياس الكثافة أي فروق إحصائية بين المجموعات (p > 0.05). الاستنتاجات: بشكل عام، أظهرت النتائج أداءً أفضل لمحلول كلورهيكسيدين 2% وهيبوكلوريت الكالسيوم 2.5% في تعقيم أقماع الغوتا-برشا ضمن الظروف التجريبية المحاكاة.
الكلمات المفتاحية: المكورات المعوية البرازية. مركبات الكالسيوم. الكلورهكسيدين. الغوتا-برشا. هيبوكلوريت الصوديوم.

مقدمة

الجوتا-بيرشا مادة حشو تُستخدم تاريخيًا في علاجات قنوات الجذر بالتزامن مع مادة الإغلاق اللبية، إذ تتمتع بثبات أبعادي كافٍ، وشفافية إشعاعية مرضية، وتوافق حيوي، كما أنها بلاستيكية حرارية. ونظرًا لطبيعتها، لا يمكن تعقيم الجوتا-بيرشا باستخدام طرق التعقيم بالحرارة الرطبة أو الجافة؛ لذلك يُنصح بالتعقيم الكيميائي عبر الغمر في محاليل مطهرة.

تم اقتراح عدة عوامل كيميائية لتعقيم أقماع الغوتا-برشا، من بينها هيبوكلوريت الصوديوم (NaOCl) والكلورهكسيدين (CHX). ينبغي أن يضمن المطهر المثالي تعقيماً سريعاً دون إحداث تغيير في بنية القمع3. يُعدّ NaOCl محلول الري المضاد للميكروبات الأكثر استخداماً على مستوى العالم في مجال العلاج اللبّي؛ وعلى الرغم من فعاليته، تشير الدلائل إلى أن ترسب بلورات متبقية على سطح الأقماع قد يؤدي إلى صعوبة الالتصاق بالمانع السدّي، مما ينجم عنه تسربات دقيقة. كما أفادت دراسات سابقة بأن الكلورهكسيدين فعّال في تعقيم أقماع الغوتا-برشا. غير أنّه عندما يُستخدم NaOCl كمحلول الري الأساسي، فإن أيّ بقايا للكلورهكسيدين على سطح القمع قد تتفاعل كيميائياً مع بقايا NaOCl داخل قناة الجذر، وهو ما قد يحدث نتيجة جفاف غير كافٍ أو بسبب تعقيدات تشريحية. وقد يؤدي هذا التفاعل إلى تكوين مركب بارا-كلوروأنيلين، وهو مركب سام يعرقل عملية إحكام سدّ قناة الجذر المعالجة.

في الآونة الأخيرة، جرى النظر في استخدام هيبوكلوريت الكالسيوم [Ca(OCl)2] في طبّ الأسنان اللبي، نظرًا لفعاليته المُرضية في مكافحة الجراثيم وقدرته على إذابة الأنسجة، ولتوافقه الأكبر مع خصائص العاج، ولتقليله من حدوث تهيّجات أثناء إجراءات الالتصاق. وعلى الرغم من هذه الإمكانات المذكورة، فإن الدراسات التي تقيّم فعالية Ca(OCl)2 في تعقيم أقماع الغوتا-برشا قليلة، وينبغي إجراؤها لتثبيت مدى صلاحيته لهذا الغرض. بالإضافة إلى ذلك، فإن البحوث المتعلقة بتأثير أساليب التحريك المختلفة على تعزيز عملية التعقيم في هذا السياق محدودة أيضًا. وأخيرًا، يُعدّ الميكروب الرئيسي المُكتشف في حالات فشل علاج القنوات اللبية هو المكورات المعوية البرازية (E. faecalis)، مما يجعل تقييم فعالية المحاليل في القضاء عليه أمرًا ضروريًا. لذلك، كان الهدف من هذه الدراسة مقارنة فعالية كلٍّ من محلول 2.5% Ca(OCl)2، و2.5% NaOCl، و2% CHX، عند تطبيقها وفقًا لأساليب تحريك مختلفة، في تعقيم أقماع الغوتا-برشا الملوّثة بالمكورات المعوية البرازية. وقد اعتمدت الدراسة الفرضية الصفرية القائلة بعدم وجود فرق في التأثير المضاد للبكتيريا بين المحاليل المختلفة، بغضّ النظر عن طريقة التطبيق.

المواد والطرق

السلالة البكتيرية وظروف الزراعة

السلالة المستخدمة في التجارب هي المكورات المعوية (ATCC 29212)، وقد تم الحصول عليها من المجموعة الأمريكية للثقافة النوعية. تم حفظ الكائنات الحية الدقيقة في وسط زرعي يحتوي على الغليسيرول، وتم تخزينها عند درجة حرارة -80°C. وقبل الاستخدام، أُذيبت العينة، وتم تلقيحها في مصل دماغي قلبي (BHI)، ثم حُضِّرت لمدة 24 ساعة.

تحديد الحد الأدنى للتثبيط والحد الأدنى للقتل البكتيري

تم تحديد التركيز التثبيطي الأدنى (MIC) باستخدام طريقة المicrodilution بالمرق في لوحة ذات 96 بئراً. ولتحديد التركيز القاتل الأدنى للبكتيريا... تم أخذ 1 ميكرولتر من كل بئر، ووضعه على أجار مولر-هينتون، ثم حُضِّر في ظروف لاهوائية عند درجة حرارة 37°C لمدة 24 ساعة. بعد ذلك، جرى تحديد المستعمرات، وسُجِّل أدنى تركيز لا يُلاحظ عنده أي نمو ميكروبي باعتباره قيمة التركيز القاتل الميكروبي (MBC).

تكوين الغشاء الحيوي: تم إنتاج الغشاء الحيوي وفقًا للظروف الموصوفة سابقًا مع بعض التعديلات. تضمنت المعالجات المطبقة التركيز الفعال الأدنى (MIC)، ومضاعفَيْ التركيز الفعال الأدنى، وأربعة أضعاف التركيز الفعال الأدنى من كلٍّ من محلول كلوريد الكالسيوم بنسبة 2.5%، ومحلول هيبوكلوريت الصوديوم بنسبة 2.5%، أو محلول كلوريد السيتيلبيريدينيوم بنسبة 2%. ولأغراض المقارنة، استُخدم سلالة الإشريكية القولونية البرازية في متوسط مولر-هينتون كسيطرة إيجابية، بينما شكّل متوسط مولر-هينتون وحده السيطرة السلبية.

تحليل البنفسج البلوري تم قياس الكتلة الحيوية باستخدام تقنية صبغ البنفسج البلوري كما وُصف سابقًا. وقد جرى تقييم النشاط المضاد للأغشية الحيوية من خلال قياس الفرق في الكثافة الضوئية بين السيطرة الإيجابية (مرق مولر-هينتون + العصية البرازية) والعلاجات المختلفة.

اختبار تثبيط الأغشية الحيوية: تم تقييم خصائص مقاومة الالتصاق لمحاليل كلوريد الكالسيوم بنسبة 2.5%، وبركلوريد الصوديوم بنسبة 2.5%، وثنائي كلوريد الإيثيلين بنسبة 2% باستخدام اختبار الأغشية الحيوية على لوحة ميكروسكوبية. حُضِّر محلول يحتوي على بكتيريا المكورات المعوية البرازية، ومرق مولر-هينتون، والعلاجات المذكورة، ثم أُخضع للحضن في ظروف لا هوائية عند درجة حرارة 37°C لمدة 24 ساعة. أُجري الاختبار وفقًا للوصف الوارد في النقطة السابقة. اعتُبِر مرق مولر-هينتون المحتوي على بكتيريا المكورات المعوية البرازية بمثابة سيطرة إيجابية، وحُسِبَت نسبة التثبيط باستخدام معادلة: (الكثافة الضوئية للمعالجة ÷ الكثافة الضوئية للسيطرة) × 100.

حساب وحدات التشكيل المستعمرات (CFUs) اتبعت المنهجية النهج الذي أوجزه باوليتو وآخرون. استُخدم ثمانية وتسعون مخروطًا من الغوتا-برشا (Dentsply Maillefer، بالايغ، سويسرا)، وفُتِحَت في ظروف معقمة. تم إصابة كل مخروط من الغوتا-برشا بشكل فردي عن طريق غمره في معلّق بكتيري داخل أنبوب صغير لمدة 48 ساعة عند درجة حرارة 37°C. ولضمان التعقيم ومراقبة التلوث، تم زرع مخروطين على وسط غذائي بعد عملية التعقيم للتأكد من خلوّهما من التلوث. بالإضافة إلى ذلك، تم زرع ثلاثة مخاريط كل 24 ساعة للتحقق من عدم وجود تلوث.

تألفت الضوابط الإيجابية من 18 مخروطاً من الغوتا-برشا، غُمرت في محلول ملحي دون معالجة، بينما تألفت الضوابط السلبية من 18 عينة غير ملوثة لكل مادة. أما المخروطات المتبقية البالغ عددها 54، فقد قُسّمت وفقاً للمحلول المستخدم في إزالة التلوث إلى ثلاث مجموعات تجريبية: كلوريد الصوديوم بنسبة 2.5% (n=18)، كبريتات الكالسيوم وأكسيد الكلور بنسبة 2.5% (n=18)، أو ثنائي كلوريد الكلورهيكسيدين بنسبة 2% (n=18). وقد خضعت كل مجموعة لمنهجيات معالجة مختلفة: بدون تحريك (3 مخاريط لمدة دقيقة واحدة و3 مخاريط لمدة 5 دقائق)، بالتحريك بالموجات فوق الصوتية (3 مخاريط لمدة دقيقة واحدة و3 مخاريط لمدة 5 دقائق)، أو بالتحريك باستخدام جهاز إيزي كلين (Easy Equipamentos Odontológicos، بيلو هوريزونتي، ولاية ميناس جيرايس، البرازيل) (3 مخاريط لمدة دقيقة واحدة و3 مخاريط لمدة 5 دقائق). وفيما يتعلق بإجراء التحريك، تم تثبيت ملف بلاستيكي إيزي كلين رقم 25.04 (Easy Equipamentos Odontológicos) على مقبض يدوي بسرعة 20,000 دورة في الدقيقة، كما تم تركيب طرف إي1 إيريسونيك (Helse Ultrasonic، ريبيراو بريتو، ولاية ساو باولو، البرازيل) على جهاز يعمل بالموجات فوق الصوتية (Sonic Laxis BP LED، شوستر، سانتا ماريا، ولاية ريو غراندي دو سول، البرازيل)، وذلك عند مستوى طاقة قدره 20%.

بعد المعالجة، وُضعت جميع العينات في أنبوب ميكروي يحتوي على 2 مل من مرق مولر-هينتون، وحُضِّرت عند درجة حرارة 37°C لمدة 48 ساعة. اختيرت عينات عشوائياً من كل مجموعة تجريبية ومجموعة ضابطة، وزُرعت على طبق أغار، وحُضِّرت عند 37°C، ثم فُحصت للكشف عن النمو بعد يومين. وفي حال ظهور نمو ميكروبي، تم التأكد من وجود البكتيريا من خلال مظهر المستعمرات والصبغة الغرامية لـ E. faecalis. كما جرى تحديد عدد الخلايا باستخدام وحدات التشكيل الكلوني (CFUs) بعد الزرع على الأطباق.

القراءة باستخدام مقياس الكثافة الضوئية: تمت متابعة نمو البكتيريا من خلال قياس الكثافة الضوئية لمعلّق البكتيريا بواسطة مقياس الكثافة الضوئية، وفقًا لطريقة Vági وآخرين مع إدخال بعض التعديلات. تم قياس 3 مل من الوسط الغذائي السائل في جهاز المطياف الضوئي، وأُعدّت زجاجتان لكل عينة مُفحوصة. كما تم قياس الزجاجة التي تحتوي على الوسط فقط كشاهد، بالإضافة إلى إجراء شاهد للبكتيريا دون إضافة أي مواد إلى الوسط.

لتحديد تركيز البكتيريا بعد المعالجات، تم قياس الكثافة الضوئية للعينات باستخدام قياس الكثافة (Carl-Zeiss، غوتينغن، ألمانيا) عند طول موجي قدره 570 نانومتر. يتجلى نمو البكتيريا في عكارة المعلق ويمكن رصده من خلال ارتفاع الكثافة الضوئية. يُعرَّف نسبة التثبيط بأنها نسبة الكثافة الضوئية للعينة (ODX) المقاسة إلى الكثافة الضوئية للعينة الضابطة (ODAC).

التصوير المجهري الإلكتروني الماسح (SEM) أُجريت صور التصوير المجهري الإلكتروني الماسح لتقييم تأثير محلول كلوريد الكالسيوم 2.5% (Ca(OCl)2). تم تحليل الغشاء الحيوي المتكون على ألواح بوليستيرين بقطر 35 ملم باستخدام جهازي مجهري إلكتروني ماسحين بعد استخدام محلول كلوريد الكالسيوم 2.5% بأشكال علاجية وفترات زمنية مختلفة. غُسل الغشاء الحيوي على الألواح بالماء المقطر، ثم ثُبّت في فرن عند درجة حرارة 60°C لمدة ساعة واحدة. بعد ذلك، طُليت العينات بالذهب بطريقة الرش الفراغي (طريقة الطلاء بالرش الفراغي 108A؛ شركة كريسنغتون للأدوات العلمية المحدودة، واتفورد، المملكة المتحدة). وقد استُخدم ميكروسكوب مجهري إلكتروني ماسح من طراز JSM-6360 (شركة JEOL، طوكيو، اليابان).

التحليل الإحصائي: أظهر اختبار شابيرو–ويلك توزيعًا طبيعيًا للقيم المُجمَّعة. لذلك، تم تحليل جميع البيانات باستخدام تحليل التباين الأحادي (ANOVA) واختبارات توكي اللاحقة. في اختبار تثبيط وتحطيم الأغشية الحيوية، اعتُبرت القيم ذات p < 0.05 (*)، وp < 0.01 (**)، وp < 0.001 (***)، وp < 0.0001 (****) ذات دلالة إحصائية عند مقارنتها بالضابط الإيجابي. وفي قياس عدد المستعمرات القابلة للحياة والنشاط المضاد للبكتيريا، اعتُبرت القيم ذات p < 0.05 ذات دلالة إحصائية عند مقارنة المحلول الملحي بالعلاجات ضمن نفس عملية التحريك (أ)، وكذلك عند مقارنة عمليات التحريك لنفس العلاج مع التحريك بالموجات فوق الصوتية (ب). أُجريت جميع التحليلات باستخدام برنامج GraphPad Prism 8.0.1 (شركة GraphPad Software Inc، سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية).

النتائج

تحديد الحد الأدنى للتثبيط والحد الأدنى للقتل الجرثومي يوضح الجدول 1 قيم الحد الأدنى للتثبيط (MIC) والحد الأدنى للقتل الجرثومي (MBC) لكلٍ من محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5%، وهيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5%، ومحلول كلوريد الكلوكسادين بتركيز 2% ضد سلالتين من المكورات المعوية البرازية (E. faecalis). وفي كلا المؤشرين، أظهر محلول كلوريد الكلوكسادين أفضل أداء.

الجدول 1. التركيز التثبيطي الأدنى (MIC) والتركيزات القاتلة البكتيرية الدنيا (MBC) لمحلول كلوريد الصوديوم بتركيز 2.5%، وملح الكالسيوم لحمض الهيبوكلوريت بتركيز 2.5%، ومحلول ثنائي كلوريد الإيثيلينيديامين بتركيز 2% ضد المكورات المعوية البرازية

اختبار تثبيط وإزالة الغشاء الحيوي أظهر كلٌّ من محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% ومحلول هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5% تدميراً ملحوظاً للغشاء الحيوي مقارنةً بالشاهد (p < 0.01)، في حين لم يُظهر محلول الكلورهكسيدين بتركيز 2% تأثيراً مُرضياً (p > 0.05). وكانت المركبات التي أبدت أفضل أداء هي محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% عند تركيز 4 أضعاف الحد الأدنى الفعّال للميكروبات (2.6 ملغ/مل)، والذي أدّى إلى خفض الغشاء الحيوي بنسبة 83.5% (p < 0.0001)، ومحلول هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5% عند تركيز ضعف الحد الأدنى الفعّال للميكروبات (0.625 ملغ/مل)، الذي أزال الغشاء الحيوي بنسبة 76.7% (p < 0.0001) (الشكل 1أ). وفيما يتعلق بتثبيط الغشاء الحيوي، كان المركب الأفضل أداءً هو محلول الكلورهكسيدين بتركيز 2% عند تركيز نصف الحد الأدنى الفعّال للميكروبات (0.012 ملغ/مل)، حيث أدى إلى تثبيط الغشاء الحيوي بنسبة 87.6% (p < 0.0001) (الشكل 1ب). وقد اعتُبرت البيانات ذات دلالة إحصائية عند مقارنتها بالشاهد.

الشكل 1. النشاط المضاد للأغشية الحيوية (أ) وتثبيط تكوّن الأغشية الحيوية (ب) لبكتيريا E. faecalis المعالجة بتركيزات مختلفة من محلول كلوريد الصوديوم 2.5%، وبروفوسفات الكالسيوم 2.5%، ومحلول الكلورهكسيدين 2%. تم التعبير عن البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري. أُجري تحليل التباين (ANOVA) متبوعًا باختبار توكي. اعتُبرت قيم p < 0.05 (*)، p < 0.01 (**)، p < 0.001 (***)، وp < 0.0001 (****) ذات دلالة إحصائية عند مقارنتها بالسيطرة الإيجابية.

الشكل 2. حساب المستعمرات الحية للغشاء الحيوي المعالج بمحلول كلوريد الصوديوم بتركيز 2.5%، وبيكربونات الكالسيوم بتركيز 2.5%، ومحلول كلورهيكسيدين بتركيز 2%، ضد المكورات العقدية البرازية في عمليات تحريك مختلفة خلال دقيقة واحدة (أ) وخمس دقائق (ب). النشاط المضاد للبكتيريا لمحلول كلوريد الصوديوم بتركيز 2.5%، وبيكربونات الكالسيوم بتركيز 2.5%، ومحلول كلورهيكسيدين بتركيز 2%، ضد المكورات العقدية البرازية في عمليات تحريك مختلفة خلال دقيقة واحدة (ج) وخمس دقائق (د)، وذلك باستخدام مقياس الكثافة الضوئية. تم التعبير عن البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري. أُجري تحليل التباين (ANOVA) تلاه اختبار توكي. اعتُبرت القيم التي تقل عن 0.05 ذات دلالة إحصائية: (أ) عند مقارنة المحلول الملحي مع العلاجات ضمن عملية التحريك نفسها؛ و(ب) عند مقارنة عمليات التحريك لنفس العلاج مع التحريك بالموجات فوق الصوتية.

حساب وحدات التشكيل المستعمرية (CFUs) خلال دقيقة واحدة من التعرض، لم يُظهر العلاج بمحلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% أي فرق مقارنةً بالمحلول الملحي، بغض النظر عن طريقة التطبيق (p > 0.05). أما العلاجات بمحلول كلوريد الكالسيوم-هيبوكلوريت بتركيز 2.5% ومحلول الكلورهكسيدين بتركيز 2% فقد أظهرت انخفاضًا معنويًا مقارنةً بالمحلول الملحي الثاني (p < 0.05). وعند التحريك لمدة 5 دقائق، أظهر العلاج باستخدام هيبوكلوريت الصوديوم تحت تأثير الاهتزاز بالموجات فوق الصوتية انخفاضًا معنويًا مقارنةً بالمحلول الملحي، كما تم الحفاظ على النتائج الأخرى التي لوحظت بعد دقيقة واحدة (p < 0.05). يُعرض ناتج الحساب في الشكلين 2A و2B.

القراءة باستخدام مقياس الكثافة الضوئية: في جميع الحالات، تمت مقارنة منحنيات النمو بالمنحنى المُحصَل عليه باستخدام محلول ملحي. أظهرت جميع المعالجات انخفاضًا معنويًا في الكثافة الضوئية مقارنةً بالشاهد الذي تلقّى محلولًا ملحيًا، باستثناء تركيز 2.5% من NaOCl دون تحريك وبحركة Easy clean، إذ لم يُظهر هذا التركيز أي انخفاض. ولم تكن هناك فروق إحصائية في تقلّص الكثافة عند مقارنة عمليات التحريك المختلفة عند المعالجة بـ 2.5% من Ca(OCl)2 أو CHX في المرتين اللتين تم اختبارهما، كما هو مبيّن في الشكلين 2C و2D. 2

التصوير المجهري الإلكتروني تُظهر الشكل 3 تدمير الغشاء الحيوي. وتُبرز صور المجهر الإلكتروني النتائج التي تم الحصول عليها.

الشكل 3. محتوى الميكروبيوم الحيوي للفيلم البكتيري لبكتيريا E. faecalis المعالجة بالمحلول الملحي لمدة دقيقة واحدة (أ) وخمس دقائق (ب)، وكذلك بتركيز 2.5% من Ca(OCl)2 ضمن عمليات تحريك مختلفة: دون تحريك لمدة دقيقة واحدة (ج) وخمس دقائق (د)، وبالتحريك بالموجات فوق الصوتية لمدة دقيقة واحدة (هـ) وخمس دقائق (و)، وبالتحريك بنظام Easy clean لمدة دقيقة واحدة (ز) وخمس دقائق (ح).

المناقشة: تقيّم هذه الدراسة عملية التعقيم السريع لأقماع الغوتا-برشا باستخدام محلول Ca(OCl)2 مع طرق تحريك مختلفة، مع مقارنة النتائج بمحلولي NaOCl وCHX اللذين استُخدما تاريخيًا لهذا الغرض. وقد أظهرت النتائج تباينًا في الفعالية المضادة للبكتيريا. التأثيرات ضد المكورات المعوية البرازية عبر السيناريوهات التي جرى محاكاتها في هذه الدراسة المخبرية، مما أدى إلى رفض الفرضية الصفرية التي صيغت في البداية.

أمام الاختبارات في أطباق الزراعة، أظهرت نتائجنا أن محلول كلوريد السيتيل بيريدينيوم بنسبة 2% كان الأكثر فعالية في تثبيط تكون الغشاء الحيوي لبكتيريا المكورات المعوية البرازية، بينما تمتعت محاليل هيبوكلوريت الصوديوم بنسبة 2.5% وبروكلوريت الكالسيوم بنسبة 2.5% بقدرة أكبر على القضاء على النوعين الميكروبيين المعنيين. وعلى الرغم من وجود جدل في الأدبيات حول أيّ المحلولين يمتلك تأثيرًا مضادًا للبكتيريا أكبر ضد الأغشية الحيوية في العلاج اللبّي (المحاليل المكلورة مقابل محاليل البيغوانيد)، فمن المرجح أن نفترض أن المحاليل المكلورة أكثر كفاءة في هذا السياق، إذ إنها مؤكسدات قوية وتطلق كميات كبيرة من حمض الهيبوكلوروس أثناء انحلالها الأيوني، وهو العامل المسؤول مباشرة عن التأثير المضاد للبكتيريا للمحلول. وفي هذا الصدد، يحدث أكسدة لا رجعة فيها للإنزيمات الضرورية للكائنات الدقيقة، مما يؤدي إلى تعطيل الوظائف الأيضية للخلية البكتيرية، وبالتالي إحداث موت الخلايا.

فيما يتعلق بالوحدات المكوّنة للكولوني (CFUs) على سطح أقماع الغوتا-برشا، تُبرز نتائجنا أنه بالنسبة لمدة إزالة التلوث مدتها دقيقة واحدة، فإن استخدام محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5%، بغض النظر عن الطريقة المستخدمة، لم يكن فعّالًا في إزالة التلوث، إذ كانت النتائج مقاربةً لنتائج الشاهد. أما محلولا كلوريد الكالسيوم بتركيز 2.5% وثنائي كلوريد الأمونيوم بتركيز 2%، فقد أثبتا فعالية مقارنةً بمجموعة الشاهد، وذلك لجميع طرق التطبيق. وفي حالة مدة إزالة التلوث التي بلغت خمس دقائق، استمرت النتائج نفسها، مع ملاحظة أن مجموعة هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% المحرّكة بالموجات فوق الصوتية قد حققت أداءً أفضل من مجموعة الشاهد. وعلى الرغم من وجود جدل حول كون هيبوكلوريت الصوديوم قد أظهر نتائج فعّالة في القضاء على بكتيريا E. faecalis داخل أجواف زراعة الخلايا، بينما لم يُظهر أداءً جيّدًا في إزالة التلوث عن أقماع الغوتا-برشا، فإن هناك دراسات سابقة تؤكد أن التأثير المضاد للبكتيريا للمغسولات ومواد علاج قناة الجذر قد يتأثر بنوع السطح ومكوّناته. لذلك، ينبغي إجراء مزيد من الدراسات لتوضيح هذه الفرضية بشكل أدق.

على عكس نتائج هذه الدراسة، أظهرت دراسة سابقة نتائج مماثلة للحلول الثلاثة في تعقيم أقماع الغوتا-برشا الملوثة بفطريات المبيضات البيضاء. لذلك، من المنطقي تصور أن فعالية هذه المحاليل قد تختلف باختلاف الكائنات الدقيقة المختبرة، وينبغي أن تستكشف الأبحاث المستقبلية هذا الجانب وتُحاكي أغشية حيوية مختلطة تمثل الكائنات الدقيقة الشائعة في التهابات قناة الجذر. وفيما يتعلق بالأداء الإيجابي لمحلول كلوريد الكلورهكسيدين بتركيز 2%، فقد يُعزى ذلك إلى قيمة الحد الأدنى للتثبيط الميكروبي (MBC) الخاصة به، كما ورد في نتائجنا، وهو ما يتوافق مع دراسات سابقة3. أما فعالية محلول هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5%، فيمكن إرجاعها إلى ارتفاع توفر الكلور النشط في هيبوكلوريت الكالسيوم مقارنةً بمحلول هيبوكلوريت الصوديوم، كما أن تفكّكه الأيوني يؤدي إلى إطلاق كمية أكبر من حمض الهيبوكلوروس، مما يُتوقع أن ينتج عنه تأثير مضاد للبكتيريا أقوى. وبالمقابل، تُظهر نتائج قياس كثافة البكتيريا لدينا أيضًا اتجاهًا نحو تقليل أكبر في عدد البكتيريا عند استخدام كلٍ من هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5% وكلوريد الكلورهكسيدين بتركيز 2%. وتُبرز صور المجهر الإلكتروني الماسح النتائج المتعلقة بهيبوكلوريت الكالسيوم. وبالنظر إلى أن محلول هيبوكلوريت الصوديوم هو الأكثر استخدامًا عالميًا كمحلول رئيس لغسل قناة الجذر، وإلى أنه عند تفاعل هيبوكلوريت الصوديوم مع كلوريد الكلورهكسيدين يحدث تفاعل كيميائي ينتج عنه مركب سام ثانوي (بارا-كلوروأنيلين) يُعرقل جودة حشو قناة الجذر، فمن المنطقي، استنادًا إلى نتائجنا، التوصية باستخدام هيبوكلوريت الكالسيوم لتعقيم سريع لأقماع الغوتا-برشا. الأقماع، إذ أظهر أداءً أفضل من محلول هيبوكلوريت الصوديوم. ومن ناحية أخرى، وبناءً على نتائجنا، يُعدّ من العملي أكثر بالنسبة للمهنيين الذين يستخدمون كلوريد الكلورهيكسيدين كمحلول الغسل الرئيسي لقناة الجذر، أن يُستخدم هذا المحلول نفسه لتعقيم الأقماع. كما تُبرز إمكانية أخرى، وهي أن التفاعل الكيميائي بين كلوريد الكلورهيكسيدين وبيكلوريد الكالسيوم، وإن أدى إلى تكوّن راسب، لا ينتج عنه 2‑بارا‑كلوروأنيلين. لذلك، تلزم دراسات إضافية لتحديد دقة المركب الناتج وما إذا كان يؤثر في عملية إحكام سد قناة الجذر، وذلك للتأكد من إمكانية استخدامه أو عدمها لتعقيم الأقماع عندما يكون محلول الغسل الرئيسي هو كلوريد الكلورهيكسيدين.

بوجه عام، لم نلحظ فروقًا ذات دلالة إحصائية فيما يتعلق بطرق تحريك محاليل الاختبار المستخدمة لإزالة التلوث عن أقماع الغوتا‑برشا. ونؤكد أن الأدبيات الحالية تفتقر إلى دراسات حول استخدام طرق التحريك لتعقيم أقماع الغوتا‑برشا، مما يصعّب مقارنة النتائج. غير أن مراجعة منهجية سابقة أظهرت عدم وجود فروق ذات دلالة في تعقيم قناة الجذر بين حالتي تحريك محلول الغسل وعدم تحريكه، مما يدل على أن الدور الرئيسي في إزالة التلوث يعود إلى محلول الغسل وخصائصه.

على الرغم من أن نتائجنا تشير إلى إمكانية التوصية باستخدام Ca(OCl)2 لتعقيم سريع لمخروطات الغوتا-برشا نظراً لأدائه المتفوق مقارنةً بـ NaOCl، إلا أنه من الضروري الإقرار بأن هذه التوصية قد تتأثر بالمواد وأنواع البكتيريا المستخدمة. وهذا يُعدّ أحد قيود هذه الدراسة الأولية. وبما أن اللعاب يحتوي على عدد كبير ومتنوع من الأنواع البكتيرية، فإن هناك حاجة إلى مزيد من الأبحاث التي تشمل أنواعاً بكتيرية مختلفة للتحقق من صحة هذه الاستنتاجات. وأخيراً، ينبغي إجراء دراسات إضافية لتقييم تأثير Ca(OCl)2 على البنية المجهرية لمخروطات الغوتا-برشا وتداعياته المحتملة على العلاج اللبّي.

على الرغم من محدودية هذه الدراسة المخبرية، يبدو أن استخدام كلوريد الكالسيوم وأوكسيد الكلور (Ca(OCl)2) في إزالة التلوث عن أقماع الغوتا-برشا يمثّل بديلاً واعداً، وهو ما تدعمه التركيبة الكيميائية لهذه المحلول. فخلال عملية التفكك الأيوني، يُطلق Ca(OCl)2 جزيئين من حمض الهيبوكلوروس (HOCl)، بينما يُطلق NaOCl جزيء واحد فقط. ونتيجة لذلك، تكون تركيزات الكلور أعلى في محلول Ca(OCl)2، مما يعزّز قدرته على التعقيم. ومع ذلك، فإن استخدام هذا المحلول في الممارسة اللبية يتطلب إجراء دراسات سريرية للحصول على نتائج أكثر متانة ولتوجيه إدماجه المحتمل في الإجراءات اللبية.

ختاماً، تؤكد نتائج هذه الدراسة فعالية كلٍّ من محلول الكلورهيكسيدين بتركيز 2% ومحاليل هيبوكلوريت الكالسيوم بتركيز 2.5% في التعقيم السريع لأقماع الغوتا-برشا الملوثة بالمكورات المعوية البرازية، مع عدم وجود فروق إحصائية بين طرق التطبيق المختلفة: دون تحريك، والتحريك بالموجات فوق الصوتية، والتحريك باستخدام مادة إيزي كلين. أما محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 2.5% فقد أظهر فعالية فقط بعد التحريك بالموجات فوق الصوتية لمدة خمس دقائق.

الشكر والتقدير نود أن نتقدم بالشكر إلى هيئة تنسيق تحسين الكفاءات العليا (CAPES) على دعمها.

إقرار بالمصالح: يُعلن المؤلفون عدم وجود أي تضارب في المصالح.

توافر البيانات: ستكون مجموعات البيانات المتعلقة بهذا المقال متاحة عند الطلب لدى المؤلف المقابل.

مساهمة المؤلفين: غيليرمي باوليتو: التصوّر؛ تنظيم البيانات؛ البحث؛ المنهجية؛ البرمجيات؛ التحقق من الصحة؛ التمثيل المرئي؛ الكتابة – المسودة الأصلية؛ الكتابة – المراجعة والتحرير. بيدرو هنريك فورتيس غويريم: تنظيم البيانات؛ البحث؛ المنهجية؛ البرمجيات؛ التحقق من الصحة؛ التمثيل المرئي؛ الكتابة – المراجعة والتحرير. آرثر بريتس باربوسا: تنظيم البيانات؛ البحث؛ المنهجية؛ البرمجيات؛ التحقق من الصحة؛ التمثيل المرئي؛ مراجعة الكتابة والتحرير. ناتاليا دي فريتاس داودت: تنظيم البيانات؛ المنهجية؛ التحقق من الصحة؛ الكتابة – المراجعة والتحرير. ليوناردو كوينتانا سواريس لوبيس: تنظيم البيانات؛ المنهجية؛ البرمجيات؛ التحليل الرسمي؛ التحقق من الصحة؛ الكتابة – المراجعة والتحرير. باتريسيا كولينغ ماركيزان: التصوّر؛ البحث؛ المنهجية؛ التحليل الرسمي؛ إدارة المشروع؛ الموارد؛ البرمجيات؛ الإشراف؛ التحقق من الصحة؛ التمثيل المرئي؛ الكتابة – المسودة الأصلية؛ الكتابة – المراجعة والتحرير. كارلوس ألكسندر سوزا بيير: التصوّر؛ الحصول على التمويل؛ البحث؛ المنهجية؛ إدارة المشروع؛ الموارد؛ البرمجيات؛ الإشراف؛ التحقق من الصحة؛ التمثيل المرئي؛ مراجعة الكتابة والتحرير. قام جميع المؤلفين بمراجعة النسخة النهائية من المخطوطة واعتمادها بشكل فعّال.

الإسناد والنطاق

باوليتو جي، غويريم بي إتش إف، باربوزا إيه بي، داودت إن إف، لوبيس إل كيو إس، ماركيزان بي كي، وآخرون. تعقيم أقماع الغوتا-برشا الملوثة بالمكورات المعوية البرازية باستخدام هيبوكلوريت الكالسيوم وهيبوكلوريت الصوديوم والكلورهيكسيدين. المجلة البرازيلية لعلوم الفم. 2026؛25:e267486. https://doi.org/10.20396/bjos.v25i00.8677486

تم إعادة الإنتاج بموجب رخصة المشاع الإبداعي الدولية 4.0 (CC BY 4.0): https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

تُقيّم هذه الدراسة المستقلة في المختبر بروتوكولات التعقيم الكيميائي لمواد الاختبار الخاصة بالمقال. ولا تهدف إلى اختبار أو تقييم أو اعتماد أو إثبات أداء نقاط هيجندو غوتا بيرشا أو نشاطها المضاد للميكروبات أو كفاءتها في التعقيم أو نتائجها السريرية. كما أن صورة كتالوج هيجندو تمثل مادة تابعة لعلامة تجارية منفصلة، وليست جزءًا من هذه الدراسة.

تُظهر أية أسماء لمنتجات أو أجهزة تابعة لجهات خارجية فقط بغرض نقل منهجية الدراسة بدقة أو ترجمتها؛ وهي لا تُعدّ بيانًا للمقارنة أو التوصية أو الانتماء من قبل هيجيندو.

البريد الإلكتروني:
info@hygendo.com

واتساب:
8613719176340

الهاتف:
+86 13719176340

العنوان:
الغرفة 218، رقم 650، طريق هواوان، حي ليوان، مدينة قوانغتشو، مقاطعة قوانغدونغ، الصين